PRÁCTICA Nº39: DETERMINANCIÓN FUNCIONAL DEL FIBRINÓGENO

Publicado el por deliamc

09/03/2015

FUNDAMENTO

El fibrinógeno se transforma en fibrina en presencia de exceso de trombina. El tiempo de formación del coágulo en esta práctica, es inversamente proporcional a la concentración de fibrinógeno presente en la muestra del plasma. En presencia de altas concentración de trombina, el tiempo de formación del coágulo en el plasma es inversamente proporcional a la concentración de fibrinógeno.

MATERIALES

  • Pipeta graduada
  • Micropipeta
  • Cubetas de coagulometro
  • Coagulometro
  • Gradilla.

REACTIVOS

  • R1 : Trombina Bovina.
  • R2: Tampón imidazol.

  • R3: Solución caolín.

  • Coagulation Cal.

MUESTRA

Plasma pobre en plaquetas.

DESARROLLO DE LA PRÁCTICA

  • Dilución 1/10 con la muestra (PPP) y R2 ( tampón imidazol) .Sería 50μl de muestra más 450μl de R2.
  • Tomamos 5 tubos y lo rotulamos según su concentración, que sería 1/40, 1/30, 1/20, 1/10, 1/5.
  • En el tubo 1/40 se le añade 3,9 ml de R2 y 100μl de coagulation.
  • En el tubo 1/30 se le añade 2,9 ml de R2 y 100μl de coagulation.
  • En el tubo 1/20 se le añade 1,9 ml de R2 y 100μl de coagulation.
  • En el tubo 1/10 se le añade 0,9 ml de R2 y 100μl de coagulation.
  • En el tubo 1/5 se le añade 0,4 ml de R2 y 100μl de coagulation.
  •  Añadimos  200 μl de cada dilución en cubetas de coagulometro y se le añade 20μl de R3 y lo atemperamos a 37º durante 4 minutos.
  • Añadimos 100 μl de reactivo R1 y cronometrar la formación del coágulo.

RESULTADOS

Curva del fibrinogeno:

Dilución del plasma calibrador.

 Concentración. Tiempo en el que coagula.

1/40

0,25*xC

 48,5

1/30

 0,33*xC

37,4

1/20

 0,5*xC

9,4

1/10

 1*xC

142,7
1/5

2*xC

7

*Tiempos obtenido en el coagulómetro.

Tiempo, en segundos, en el que coagula la muestra: 10 segundos.
LA FIBRINOGENIA ES NORMAL

EJERCICIOS

1º. ¿De qué tipo es la determinación de fibrinógeno realizada en esta práctica? Esta práctica se basa en la medición del tiempo que tarda un exceso de trombina en degradar a fibrina el fibrinógeno presente en un PPP diluido y, por tanto, en formar un coágulo.

2º. ¿A qué concentración está la trombina bovina? A una concentración de 100 U NIH/ml.

3º. ¿A qué dilución se somete a la muestra? A 1/10.

4.º¿Cuál es la fibrinogenemia normal? La fibrinogenemia normal oscila entre los 150 y los 450 mg/dl.

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