PRÁCTICA Nº40: PRUEBA DE MEZCLA CON PLASMA NORMAL

10/03/2015

OBJETIVO

Las pruebas de mezclas se realizan cuando alguno de los tiempos determinados en el plasma problema está alargado. Para llevarlas a cabo se mezclan, a partes iguales, el plasma problema y un plasma o un suero que se sabe que es normal.

FUNDAMENTO

La prueba de mezcla con plasma normal se practica, generalmente, cuando en el plasma problema se determina un TP normal y un TTPA alargado. En estas circunstancias se supone que el paciente sufre un déficit de algún factor de la vía intrínseca.

MATERIALES

• Gradilla.
• Cubetas de coagulómetro.
• Trocitos de acero para las cubetas de coagulómetro.
• Rotulador de vidrio.
• Micropipeta de 100microlitros.
• Coagulómetro.
• Baño de agua ajustable a 37ºC.
• Tubos de ensayo de plástico.

REACTIVOS

• Solución de cloruro cálcico 0,025M.
• Cefalina activada con ácido elágico.
• Pool de plasmas normales o plasma control.

MUESTRA

Plasma pobre en plaquetas (PPP).

DESARROLLO DE LA PRÁCTICA

• Diluir la muestra problema con un pool de plasmas normales 1/2 (100microlitros muestra + 100microlitros control) e introducirla en un tubo de ensayo de plástico correctamente identificado(MD, muestra diluida).

• Incubar la dilución preparada en el baño a 37ºC durante 15 minutos.
• Rotular dos tubos de ensayo de plásctico y depositarles las cantidades que posteriormente usaremos:

1. CaCl2.
2. CA, cefalina activada.

• Atemperar los reactivos a 37ºC durante 5 minutos.
• Verter 100μl de la dilución en una cubeta de coagulómetro identificada como M.
• Añadir 100μl de cefalina activada a la cubeta.
• Incubar la mezcla a 37ºC durante 2 minutos.
• Medir el tiempo de coagulación añadiendo 100μl de CaCl2.

RESULTADOS

El resultado ha sido 80 segundos. Los valores normales oscilan entre 30 y 40 segundos.

EJERCICIOS

1º. ¿Cuándo debe hacerse una prueba de mezcla con plasma normal? Cuando el TTPA esta alargado.

2º. Si tras la mezcla con plasma normal, no se corrige el TTPA, ¿Qué se debe investigar? El trastorno coagulatorio como a actuación de sustancias inhibidoras de la coagulación.