PRÁCTICA Nº38: CURVA DE ACTIVIDAD DE LA PROTOMBINA

06/03/2015

FUNDAMENTO

Para construir una curva de actividad de la protrombina se prepara una batería de disoluciones, a partir de un plasma control normal y se mide el TP del plasma control normal no diluido y de cada una de las disoluciones preparadas

Tras ello se asigna el 100% de actividad al numero de segundos medidos en la determinación del TP del plasma control normal puro , y se calcula el porcentaje que , proporcionalmente , les corresponde a los valores de TP determinados en cada una de las disoluciones de este.

MATERIAL

• Tubos de ensayo de plástico
• Rotulador
• Prepipeta de seguridad
• Pipeta graduada de vidrio o micropipeta de 1000 μl
• Micropipeta de 100 μl y 200 μl
• Puntas de micropipeta
• Cubetas de coagulometro
• Acero
• Coagulómetro

REACTIVOS

• Solución salina al 0.85%
• Tromboplastina cálcica
• Pool de plasma normales

DESARROLLO DE LA PRÁCTICA

• Centrifugamos la sangre.
• Sacamos el plasma obtenido y lo mezclamos con el otro plasma de los años pasados.
• Rotulamos los 5 tubos de ensayo (100; 50; 33; 25; 10).
• Introducimos en los 5 tubos 200 μl de pool de plasmas.
• En el tubo numero 100, añadimos 0 μl de solución salina con una micropipeta.
•  En el tubo numero 50, añadimos 200 μl de solución salina con una micropipeta.
• En el tubo numero 33, añadimos 400μl de solución salina con una micropipeta.
• En el tubo numero 25, añadimos 600μl de solución salina con una micropipeta.
• En el tuno numero 10, añadimos 1800μl de solución salina con una pipeta de cristal de 2 ml.
• Rotulamos las cubetas y las introducimos en el coagulómetro.
• Echamos 100 ul de cada tubo en las cubetas.
• Añadimos en una cubeta reactivo.
• Ponemos el tubo 100 debajo del tapón rojo y añadimos 200μl y en los demás tubos hacemos el mismo proceso.
• Leemos los resultados con el coagulómetro.

RESULTADO

    TIEMPO DE PROTROMBINA
Plasma control no diluido            12.3
Plasma control diluido                  19
Plasma control diluido a 1/3       25.3
Plasma control diluido a 1/4       32.4
Plasma control diluido a 1/10     61.3

El TP es el tiempo transcurrido desde la adición de la tromboplastina cálcica hasta la formación del coágulo de fibrina

EJERCICIOS

1. ¿Con que se diluye el pool de plasma normal o el plasma control normal? Solución salina al 0.85%.

2. ¿Que porcentaje de actividad se asigna a la dilución del plasma control de 1/2? 50%.

3. ¿Cuando se pone en marcha la lectura del coagulometro? Cuando incorporamos la placa el coagulómetro y le añadimos el reactivo.

4. ¿Que se anota en el eje de ordenadas? Se anota el % y el tiempo de protrombina.