PRÁCTICA Nº18. DETECCIÓN DE CUERPOS DE HEINZ

28/11/2014

OBJETIVO

Buscar cuerpos de Heinz en alguna célula sanguínea. Aprender su morfología a través del microscopio óptico utilizando una tinción para nosotros nueva, cristal violeta.

FUNDAMENTO

Los cuerpos de Heinz son pequeñas inclusiones, redondes y retráctiles, que se ponen de manifiesto con una solución de cristal violeta y que se encuentran en la periferia de los hematíes. Están formados por globina desnaturalizada, que se produce cuando se destruye la hemoglobina.

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Se presenta tanto en eritrocitos jóvenes, como en maduros y se observan en las siguientes condiciones clínicas:

• Talasemia
• Deficiencia de glucosa-6-fosfato-deshidrogenasa
• Favismo (Se denomina favismo a la hemólisis aguda que se desarrolla en algunos individuos después de la ingestión de habas (Vicia faba) o la inhalación del polen de esta planta).
• Hemoglobinopatías inestables
• Enfermedad de Wilson

 MATERIAL NECESARIO

• Tubo de ensayo

• Gradilla

• Vaso de precipitado

• 2 pipetas graduadas

• Prepipeta

• Pipeta pasteur con chupete

• Parafilm

• Baño de agua

• 2 portaobjetos

• Microscopio

REACTIVOS

• Solución de cristal violeta

• Aceite de inmersión

 

MUESTRA

Sangre venosa anticoagulada.

DESARROLLO DE LA PRÁCTICA

1. Preparación del colorante

• Pesamos 20g de cristal violeta en una balanza.
• Una vez pesados, los vertemos en un matraz erlenmeyer y le añadimos 80ml de suero fisiológico y 20 ml de agua destilada.
• Mezclamos hasta diluir completamente.
• Preparamos un filtro con papel de filtro.
• Colocamos el filtro dentro de un embudo y éste dentro de otro matraz erlenmeyer.
• Filtramos la disolución de colorante.
• Añadimos al filtrado 82ml de suero fisiológico y 18ml de agua destilada.
• Mezclamos.
• Vertemos la solución de cristal violeta en un frasco ambarino para su conservación a temperatura ambiente y etiquetamos.

2. Preparación de la muestra y tinción

• Preparamos el material que vamos a necesitar a lo largo de la práctica.

 

• Mezclamos en un tubo de ensayo volúmenes iguales de la solución de cristal violeta y de la muestra de sangre que deseemos analizar. Para ello, cogemos 1ml de sangre y 1ml de tinción.

• Tapamos el tubo con parafilm

• Metemos la muestra en el baño de agua a 37ºC, durante 5 minutos.

• Realizamos una extensión sanguínea.

• Dejamos secar la extensión.

• Una vez seca la preparación, añadimos una gota de aceite de inmersión y observamos al microscopio.

OBSERVACIÓN AL MICROSCOPIO

Se observan precipitados por toda la preparación

OBSERVACIONES

La lectura de los resultados no es fiable, pues la muestra proviene de un donante sano y creemos que los precipitados se deben a que la solución que hemos empleado para teñir no está en buenas condiciones.

EJERCICIOS

1. ¿Cuál es el colorante usado para teñir los cuerpos de Heinz? Solución de cristal violeta.

2. ¿De qué color son los cuerpos de Heinz teñidos? De color púrpura.

3. ¿Dónde se localizan los cuerpos de Heinz? En la periferia de los eritrocitos.

RESULTADOS OBTENIDOS

En la sangre analizada: No se han encontrado cuerpos de Heinz reales.

Valoración de los resultados: No se pueden valorar, pues la coloración creemos estaba en mal estado.