PRÁCTICA Nº46: DETERMINACIÓN DEL GRUPO Rh EN TUBO

Publicado el por deliamc

05/05/2015

OBJETIVO

Detectar el grupo Rh en una sangre problema

FUNDAMENTO

Al igual que en la determinación en porta, intentamos poner de manifiesto la presencia o ausencia del antígeno D en la superficie de los hematíes, mediante enfrentamiento a un anti suero-D.

MATERIALES

  • Tubos de centrífuga
  • Rotulador de vidrio
  • Gradilla
  • Pipetas pasteur
  • Centrífuga
  • Papel parafilm

REACTIVOS

  • Suero anti-D
  • Albúmina bovina al 30%
  • Suero salino 0,9%

MUESTRA

Suspensión de hematíes al 5%

DESARROLLO DE LA PRÁCTICA

  • Rotulamos dos tubos con las letras D y A.
  • En el tubo D añadimos una gota de suero anti-D y una gota de suspensión de hematíes.
  • En el tubo A añadimos una gota de albúmina y una gota de suspensión de hematíes.
  • Agitamos suavemente los tubos.
  • Centrifugamos a 1000 rpm, 1′.

RESULTADO

Damos suaves golpecitos ene le extremo inferior del tubo, para despegar el botón hemático.

  • Si hay aglutinación, aparecerán grumos rojos en líquido claro.
  • Si no la hay, habrá resuspensión homogénea de los hematíes.

El tubo con albúmina es un control negativo, por lo que:

  • Si en el tubo D, la aglutinación es positiva (+) y en tubo A negativa (-) → Rh +.
  • Si en tubo D – y en el A – también, incubamos a 37ºC, 30′ y después centrifugamos a 1000 rpm, 1′.

Si sigue el resultado -, se hace una prueba de Coombs indirecta. Si sigue saliendo -, el paciente es Rh-.

A nosotros nos ha salido Rh+.

EJERCICIOS

1. ¿Por qué utilizamos el control de albúmina? Porque los hematíes pueden revestirse in vivo de anticuerpos o proteínas plasmáticas anormales, que en presencia de albúmina podrían producir una agregación que daría la idea de una aglutinación positiva.

2. ¿Qué ocurre si no aparece aglutinación? Se resuspenden homogéneamente los hematíes.

3. ¿Qué debemos detectar mediante un Coombs indirecto? Que el paciente no posee el antígeno Du.

4. ¿Cómo se prepara la muestra problema? 

1º Se lava con suero salino tres veces:

  • Cogemos 0,5ml de la muestra y la depositamos en un tubo de centrífuga.
  • Completamos con solución salina y agitamos suavemente.
  • Centrifugamos a 2000 rpm, 4′.
  • Retiramos totalmente el sobrenadante.
  • Lo realizamos 2 veces más.

2º Cogemos 5 gotas de los hematíes lavados y le añadimos 5ml de suero fisiológico.

 

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